Modifikacija fosforilacije
Istraživanje fosforiliranih proteina i peptida može pomoći ljudima da razjasne mehanizam gore navedenog procesa i dalje razumiju prirodu životnih aktivnosti. Posljednjih godina, s kontinuiranim razvojem tehnologije proteomike, proučavanje fosforilacije proteina dobija sve veću pažnju. Mnogi prirodni toksini i patogeni također ispoljavaju svoje djelovanje mijenjajući status fosforilacije intracelularnih proteina.
Fosforilovani polipeptidi se uglavnom odnose na Ser, Tyr i Thr. Hidroksilna grupa bočnog lanca ostatka je modifikovana u kiseli fosfatni polipeptid. Do sada, modifikacija fosforilacije polipeptida uglavnom uključuje post{1}}metodu fosforilacije i dvije metode sinteze:
Kada se modificira monomernom metodom, fosforilirana aminokiselina se teško kondenzira s peptidnim lancem zbog sterične smetnje uzrokovane većom grupom za modifikaciju bočnog lanca, a naknadno uvođenje aminokiselina će biti teže. Naročito kada sadrži višestruke modifikacije mjesta fosforilacije, sinteza će postati izuzetno teška, a konačni proizvod ima složene komponente, teško ga je odvojiti i ima izuzetno nizak prinos. Stoga, kada je više mjesta u peptidnom lancu fosforilisano, može se razmotriti metoda post-fosforilacije. Glavni proces sinteze je da se selektivno ukloni zaštitne grupe bočnog lanca aminokiselina koje treba označiti nakon što je sinteza polipeptida završena. Za Tyr, Thr aminokiseline sa nezaštićenim bočnim lancima mogu se koristiti direktno za reakciju. Zaštitna grupa bočnog lanca sa 1% TFA/DCM Može se kvantitativno ukloniti pod određenim uslovima. Tokom post-fosforilacije, bis benzil fosforamidit se može koristiti. Tetrazol stvara fosforamidit tetrazol aktivni intermedijer, koji je povezan s hidroksilnom grupom, a zatim oksidira pod peroksikiselim uvjetima kako bi se stvorila fosforilna grupa za završetak reakcije.
- Pružamo usluge modifikacije fosforilacije pSer, pTyr, pThr i D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
- Modifikacije fosforilacije 2 mjesta, 3 mjesta, 4 mjesta i 5 mjesta mogu se izvoditi istovremeno.
Fosforilirani peptidi Sintetički slučaj (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) čekati)
1. Postoje 4 mjesta fosforilacije u sekvenci (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), čistoća je 95% i ciklus završetka je 3 sedmice.
